产品货号:
BY0005
中文名称:
直扩PCR预混反应液
英文名称:
2×Direct PCR Mix
产品规格:
1mL|10mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本产品包含高纯度Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应的增强剂、优化剂以及稳定剂,浓度为2×。本产品比普通Taq酶扩增效率高、错配率低,具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好、扩增速度快(30~60秒/kb)等优点。可最大限度地减少人为误差,可用于高特异性PCR反应及GC含量较高(>60%),具有二级结构等复杂模板的扩增和大规模基因检测。PCR产物的3’端附有一个突出的"A"碱基,纯化后可直接用于TA载体克隆。
本产品有含蓝色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳。也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。适用于鼠尾,昆虫,拟南芥,水稻,玉米,小麦等多种基因组DNA扩增。
保存:-20℃,有效期1年。
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本产品有含蓝色染料,在PCR反应完成后,不需添加上样缓冲液即可直接上样进行电泳。也可经过纯化处理,以用于酶切、连接、荧光测序等后续操作。蓝色染料可指示电泳进程,其迁移速度在1% TAE琼脂糖凝胶中与500bp双链DNA片段相近。适用于鼠尾,昆虫,拟南芥,水稻,玉米,小麦等多种基因组DNA扩增。
组分 | 1mL | 10mL |
2×Direct PCR Mix | 1mL | 10×1mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃,有效期1年。
- 配制PCR反应体系
冰上溶解PCR反应所需的各种溶液,按下表加入各成分建立20μL反应体系。成分 用量 DNA模板 1~2μL 正向引物(10μM) 0.5μL 反向引物(10μM) 0.5μL 2×Direct PCR Mix 10μL Nuclease-free水 至20μL - 设置PCR反应程序
过程 温度 时间 循环数 预变性 95℃ 3min 1 变性 94℃ 25s 25~32 退火 55~64℃ 25s 延伸 72℃ 30~60s 终延伸 72℃ 5~10min 1
注:
① 以粗提物为模板做PCR降低扩增速度有利于得到稳定结果,建议延伸时间60秒/kb。
② 以粗提物为模板做PCR因为模板量更少,循环数应比用CTAB提取DNA做模板PCR循环数多2~3个循环。
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